2012年11月13日，由北京檢驗(yàn)檢疫局承擔(dān)的國家質(zhì)檢總局科技計(jì)劃項(xiàng)目--《豬傳染性胃腸炎病毒特異性單抗研制》、《豬的五種重要疫病基因芯片檢測(cè)技術(shù)研究》和《口蹄疫、禽流感HDA快速檢測(cè)技術(shù)研究》順利通過專家鑒定。專家一致認(rèn)為：三個(gè)項(xiàng)目的研究成果均達(dá)到國際先進(jìn)水平，填補(bǔ)了國內(nèi)相關(guān)領(lǐng)域檢測(cè)技術(shù)研究的空白。
鑒定會(huì)上，由7名專家組成的鑒定委員會(huì)審查了項(xiàng)目組提交的相關(guān)資料，聽取了項(xiàng)目組的工作報(bào)告和技術(shù)報(bào)告，并對(duì)研究過程進(jìn)行了質(zhì)詢，經(jīng)科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)、認(rèn)真細(xì)致地審議鑒定后一致認(rèn)為：三個(gè)項(xiàng)目的研究成果均達(dá)到國際先進(jìn)水平，填補(bǔ)了國內(nèi)相關(guān)領(lǐng)域檢測(cè)技術(shù)研究的空白，具有潛在的應(yīng)用前景，同意通過項(xiàng)目成果鑒定。
豬傳染性胃腸炎是引起我國及世界各養(yǎng)豬國家仔豬早期死亡的重要疫病之一，具有高度接觸傳染性，可引起豬的嚴(yán)重腹瀉、嘔吐和脫水，對(duì)養(yǎng)豬業(yè)具有重大危害。在進(jìn)出口國際貿(mào)易中，許多國家都要求在頒發(fā)進(jìn)口許可證之前先確定豬群沒有感染TGE 病毒。我國與多個(gè)國家簽訂的活豬進(jìn)出口檢疫雙邊條款中，明確規(guī)定對(duì)本病進(jìn)行檢疫。目前國內(nèi)尚沒有用于鑒別檢測(cè)血清中TGE 病毒和/或PRC 病毒抗體的ELISA 方法和試劑盒。
《豬傳染性胃腸炎病毒特異性單抗研制》項(xiàng)目組建立了豬傳染性胃腸炎病毒抗體檢測(cè)的間接ELISA和阻斷ELISA檢測(cè)技術(shù)，豬傳染性胃腸炎病毒與豬呼吸道冠狀病毒熒光RT-PCR鑒別檢測(cè)技術(shù)，并研制出3種檢測(cè)試劑盒，國內(nèi)外未見報(bào)道；研制出的2種ELISA試劑盒可有效檢測(cè)豬傳染性胃腸炎病毒抗體，研制出的熒光RT-PCR試劑盒可有效用于豬傳染性胃腸炎病毒與豬呼吸道冠狀病毒的鑒別診斷，經(jīng)與同類商品化診斷試劑盒符合性比較與臨床樣品驗(yàn)證，試劑盒靈敏、特異。
據(jù)該項(xiàng)目主持人高志強(qiáng)博士介紹，研究成果采用生物技術(shù)，在重組表達(dá)豬傳染性胃腸炎病毒特異性表面蛋白的基礎(chǔ)上，研制出針對(duì)TGE病毒和PRC病毒的群特異性單抗和亞群特異性單抗，建立阻斷ELISA方法，在此基礎(chǔ)上研制出相應(yīng)的診斷試劑，一方面用于國內(nèi)動(dòng)物疫病防控和養(yǎng)殖企業(yè)疫情監(jiān)測(cè)，對(duì)于疫情的快速鑒別診斷和盡早采取防控措施、減數(shù)企業(yè)損失，防止疫情擴(kuò)散方面可發(fā)揮重要作用；另一方面在進(jìn)出口動(dòng)物檢疫中應(yīng)用，擺脫依賴進(jìn)口試劑盒，促進(jìn)和規(guī)范國產(chǎn)試劑使用，具有顯著的社會(huì)效益。
專家一致認(rèn)為，該研究成果的應(yīng)用將對(duì)口岸防止該病傳入以及國內(nèi)疫病的快速檢測(cè)防控發(fā)揮重要作用。
《豬的五種重要疫病基因芯片檢測(cè)技術(shù)研究》項(xiàng)目組建立了一種同時(shí)提取并純化RNA和DNA的方法，并研制了核酸提取試劑盒；首次建立了同時(shí)在一個(gè)體系內(nèi)檢測(cè)高致病性豬藍(lán)耳病、口蹄疫、豬瘟、豬戊型肝炎、豬鏈球菌的五重RT-PCR檢測(cè)方法；首次研制了同時(shí)檢測(cè)高致病性豬藍(lán)耳病、口蹄疫、豬瘟、豬戊型肝炎、豬鏈球菌等五種病原的基因芯片診斷試劑盒，敏感性高、特異性強(qiáng)。
據(jù)悉，基因芯片技術(shù)應(yīng)用于豬疫病檢測(cè)有如下優(yōu)勢(shì)：一是高通量、特異性強(qiáng)、靈敏度高，可在同一張芯片上對(duì)多個(gè)樣品進(jìn)行多種豬病病原體的檢測(cè)，需要待檢樣品用量小，可特異性的鑒定病原體的亞型和變異；二是操作簡(jiǎn)單、自動(dòng)化、時(shí)間快，可大大縮短檢測(cè)時(shí)間，減少檢驗(yàn)步驟，節(jié)約檢測(cè)成本。因此，建立重要豬病基因芯片診斷技術(shù)體系可檢測(cè)豬有無感染病原及感染程度，及時(shí)發(fā)現(xiàn)某些重要豬傳染病的病原體及其傳播情況，便于養(yǎng)豬生產(chǎn)中采取早期治療和隔離措施，降低豬病流行和突發(fā)感染帶來的經(jīng)濟(jì)損失。同時(shí)高通量的基因芯片診斷技術(shù)體系大大縮短了檢測(cè)時(shí)間，可應(yīng)用于樣品的大規(guī)模篩檢、快速檢測(cè)和鑒別診斷，尤其適用于進(jìn)出境動(dòng)物檢驗(yàn)檢疫，可滿足動(dòng)物及動(dòng)物產(chǎn)品在進(jìn)出口貿(mào)易中的快速通關(guān)要求。
口蹄疫是世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）規(guī)定的必須通報(bào)的動(dòng)物疫病，在我國被列為一類動(dòng)物傳染病；禽流感被世界衛(wèi)生組織(WHO)認(rèn)為是對(duì)人類造成潛在威脅的最主要的疾病之一，我國也將高致病性禽流感列入一類動(dòng)物傳染病進(jìn)行防制。對(duì)于口蹄疫和禽流感這兩種疾病的防制工作是檢驗(yàn)檢疫執(zhí)法部門、食品安全監(jiān)管部門和國際貿(mào)易工作者目前面臨的主要任務(wù)。
《口蹄疫、禽流感HDA快速檢測(cè)技術(shù)研究》項(xiàng)目組首次建立了針對(duì)口蹄疫病毒5'UTR基因的FMDV RT-HDA快速檢測(cè)技術(shù)和實(shí)時(shí)熒光FMDV RT-HDA快速檢測(cè)技術(shù)，研制出檢測(cè)口蹄疫病毒的RT-HDA試劑盒和實(shí)時(shí)熒光RT-HDA試劑盒；首次建立了針對(duì)禽流感病毒M基因的AIV RT-HDA快速檢測(cè)技術(shù)和實(shí)時(shí)熒光AIV RT-HDA快速檢測(cè)技術(shù)，研制出檢測(cè)禽流感病毒的RT-HDA試劑盒和實(shí)時(shí)熒光RT-HDA試劑盒；該項(xiàng)目研制的四種基于HDA技術(shù)的檢測(cè)試劑盒，靈敏度高，特異性強(qiáng)，適用于臨床疫病的監(jiān)測(cè)和診斷，以及進(jìn)出境動(dòng)物的檢疫。
據(jù)悉，本項(xiàng)目運(yùn)用"依賴解旋酶恒溫基因擴(kuò)增技術(shù)"開發(fā)建立了重要人畜共患病口蹄疫和禽流感的HDA快速檢測(cè)方法，研發(fā)的出具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的試劑盒，填補(bǔ)了該項(xiàng)技術(shù)在口蹄疫和禽流感檢測(cè)應(yīng)用方面的空白。HDA快速檢測(cè)技術(shù)具有簡(jiǎn)單、高效的特點(diǎn)，適于在基層檢測(cè)部門和養(yǎng)殖場(chǎng)使用，進(jìn)行疫情實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，及時(shí)淘汰和清除感染畜禽，降低病毒的感染率，有助于我國控制和凈化口蹄疫、禽流感。此外，該研究成果可以直接應(yīng)用于引種和畜禽產(chǎn)品進(jìn)出口貿(mào)易的檢疫工作中，保證嚴(yán)格的檢疫結(jié)果，為綠色食品安全保駕護(hù)航，具有重要的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。
